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標題: 流式細胞儀的原理和操作過程 [打印本頁]

作者: 9549872673 時間: 2024-7-24 17:57
標題: 流式細胞儀的原理和操作過程
　　流式細胞儀的原理可以通過參數測量、樣品分選及數據處理等**方面進行分析，操作過程包括準備樣品、機器設置、數據獲取等。

　　原理詳解：

　　1. 參數測量：

　　流式細胞儀能夠同時進行多參數測量，這些信息主要來源于特異性熒光信號及非熒光散射信號。

　　當細胞或微粒通過激光照射的測量區時，儀器會捕捉散射光和熒光信號，這些信號提供有關細胞大小、形狀、內部結構以及表面標志表達的信息。

　　前向角散射光(FSC)通常與細胞大小相關，而側向散射光(SSC)則與細胞內部復雜性相關，例如細胞內顆粒的數量和類型。

　　熒光信號則通過特定波長的激光器激發標記在細胞上的熒光染料產生，并且通過光電倍增管(PMT)檢測和轉換這些信號為電信號。

　　通過對散射光與熒光信號的混合分析，研究人員可以得到單個細胞的詳盡特性，如免疫表型、活性狀態等。

　　2. 樣品分選及數據處理：

　　在分析的基礎上，流式細胞儀還可以根據預設的參量范圍對特定細胞亞群進行分選。

　　分選過程中，通過電荷吸引的方式將含有目的細胞的液滴導向收集容器，實現特定細胞的分離。

　　數據分析通常涉及多種算法和可視化技術，以突出顯示細胞群體間的微妙差異，并可進行后續的詳細研究或培養。

　　操作過程：

　　1.準備樣品：

　　確保所有待測樣本是單細胞懸液，對于貼壁細胞或組織樣本，需要事先處理成適合儀器讀取的格式。

　　2.機器設置：

　　調整儀器設置，包括激光強度、光電倍增管電壓和濾鏡組合，以確保最佳信號采集。

　　使用對照樣品(未染色的細胞或標記有已知量熒光染料的細胞)來優化儀器參數，確保實驗的準確性。

　　3.數據獲取：

　　上樣并開始數據獲取，實時監控數據質量，必要時進行調整以保證數據的準確性和可靠性。

　　4.數據分析：

　　采用專業軟件對獲取的數據進行分析，包括細胞群體的設門(Gating)和多參數分析。

　　5.結果驗證與保存：

　　對分析結果進行驗證，確保與預期實驗目標一致，并將重要數據妥善保存，為發表研究成果或進一步研究提供依據。

作者: 八月二十七日 時間: 2024-9-19 15:20
這么專業的分析，真是大開眼界。

作者: 榴蓮小甜心 時間: 2024-9-20 04:22
我覺得我們可以從不同角度看待這個問題，也許會有新發現。

作者: 鐵皮火車不停開 時間: 2024-9-20 04:27
你的帖子很有幫助，我們將認真對待這些信息。期待你更多的分享。

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