脂肪酸的測定方法和原理

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脂肪酸的測定方法主要包括氣相色譜法（GC）、氣相色譜-質譜聯用法（GC-MS）以及滴定法等，其原理基于脂肪酸甲酯化后的分離和檢測，以下是具體介紹：

測定方法

• 氣相色譜法（GC）
  • 原理：利用試樣中各組分在色譜柱中的氣相和固定液液相間的分配系數不同，當氣化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運行時，組分就在其中的兩相間進行反復多次的分配（吸附-解吸附或溶解-放出）。由于固定相對各組分的吸附或溶解能力不同，因此各組分在色譜柱中的運行速度就不同，經過一定的柱長后，試樣中被分離的各組分即能達到完全分離。
  • 操作步驟：通常包括脂肪提取、甲酯化、色譜分析等步驟。脂肪提取可采用索氏提取或氯仿-甲醇法等方法；甲酯化過程通常涉及使用如氫氧化鈉甲醇溶液、硫酸甲醇溶液等試劑，將脂肪酸酯轉化為相應的脂肪酸甲酯；色譜分析則使用氣相色譜儀進行。
    
• 氣相色譜-質譜聯用法（GC-MS）
  • 原理：結合了氣相色譜的分離能力和質譜的定性、定量能力。樣品經GC分離為單一組分，各組分依次與載氣同時流出色譜柱，再經接口進入質譜儀。樣品分子在離子源內電離，產生各種各樣的離子，這些離子經過質量分析器按其質荷比分離，分離后的離子依次被檢測器檢測，并形成一個按離子質荷比排列的質譜圖。計算機自動檢索并迅速識別樣品，提供各組分的定性和定量信息。
  • 操作步驟：與氣相色譜法類似，但在色譜分析后增加了質譜分析步驟。
    
• 滴定法
  • 原理：使用氫氧化鉀-乙醇溶液滴定中和提取液中的游離脂肪酸，以酚酞變色顯示終點。該方法簡單易行，不需要特殊儀器和試劑。
  • 操作步驟：包括試樣處理、測定和空白試驗等步驟。試樣處理通常是用無水乙醇提取脂肪酸；測定則是用氫氧化鉀-乙醇溶液滴定提取液中的游離脂肪酸；空白試驗則是用無水乙醇代替試樣進行滴定，以消除系統誤差。
    
  
  

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