|
一、檢測原理 直鏈淀粉與支鏈淀粉在結構上的差異導致它們與碘試劑的反應特性不同： - 直鏈淀粉：呈螺旋狀結構，能與碘形成穩定的藍色復合物，吸收峰在620-650nm。
- 支鏈淀粉：分支結構阻礙碘的嵌入，形成紫紅色復合物，吸收峰在550nm左右。
通過測定樣品溶液在特定波長下的吸光度，結合標準曲線或內置算法，即可計算出直鏈淀粉的含量。 二、檢測方法（以分光光度法為例）1. 樣品制備- 粉碎：將谷物樣品（如大米）粉碎至過60-100目篩，確保均勻性。
- 脫脂（可選）：若樣品脂肪含量高（如玉米），需用石油醚或乙醚脫脂，避免干擾。
- 稱樣：精確稱取0.1-0.2g樣品（根據儀器要求調整）至試管中。
2. 試劑配制- 乙醇溶液：95%乙醇，用于溶解樣品中的雜質。
- 氫氧化鈉溶液：0.5mol/L，用于糊化淀粉。
- 乙酸溶液：1mol/L，中和堿性環境。
- 碘試劑：通常為碘-碘化鉀溶液（如0.09mol/L I? + 0.3mol/L KI），需避光保存。
- 直鏈淀粉標準品：用于繪制標準曲線（如馬鈴薯直鏈淀粉）。
3. 檢測步驟- 糊化：
- 向試管中加入5-10mL 0.5mol/L NaOH溶液，沸水浴加熱10-15分鐘，使淀粉充分糊化。
- 冷卻至室溫后，用蒸餾水定容至50-100mL（根據樣品量調整）。
- 中和：
- 取2-5mL糊化液至另一試管，加入1mol/L乙酸溶液中和至中性（pH≈7），避免堿性環境影響碘反應。
- 顯色：
- 加入2-5mL碘試劑，搖勻后靜置10-15分鐘，使淀粉-碘復合物充分形成。
- 比色測定：
- 將樣品溶液倒入比色皿，放入直鏈淀粉測定儀中，在620-650nm波長下測定吸光度（A）。
- 同時測定空白溶液（不含樣品的試劑混合液）的吸光度（A?），用于校準。
4. 結果計算- 標準曲線法：
預先用已知濃度的直鏈淀粉標準品繪制吸光度-濃度標準曲線，根據樣品吸光度從曲線中查得含量。 - 儀器內置算法：
現代直鏈淀粉測定儀可直接輸入吸光度值，儀器自動計算并顯示直鏈淀粉含量（%）。
三、關鍵注意事項- 樣品均勻性：粉碎后的樣品需充分混勻，避免粒度差異導致結果偏差。
- 試劑純度：使用分析純試劑，碘試劑需現用現配，避光保存。
- 反應時間：顯色時間需嚴格控制（通常10-15分鐘），時間過長或過短均會影響結果。
- 波長選擇：根據儀器說明書選擇最佳波長（如620nm或650nm），不同儀器可能略有差異。
- 溫度控制：糊化步驟需在沸水浴中完成，確保淀粉充分溶解。
- 干擾物質：若樣品含色素（如黑米）或高脂肪，需預先脫色或脫脂處理。
| 
|Archiver|小黑屋|制造論壇
( 浙B2-20090312-57 )|網站地圖
發表于 2025-8-8 14:42:42
發表于 2025-11-15 19:48:22
